轉染試劑是一種非脂質體轉染試劑，廣泛適用于轉染各種細胞系，且細胞毒性非常低。由于使用該轉染試劑轉染時不要求去除血清或培養(yǎng)液，并且轉染后也不要求換液去除，因而使用起來非常方便。
轉染試劑瞬時轉染方法：
1. 接種細胞：轉染前一天，用膠原酶消化細胞并計數。調整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到 70~80%。
2. 準備 DNA-PEI 復合物： DNA、EZ Trans 試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據下表所示，用 Opti-MEM ITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量 DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋EZ Trans 試劑。每 1 μg DNA 需用2-5 μL EZ Trans轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有 DNA 溶液的試管，一邊將稀釋的EZ Trans轉染試劑滴加至試管中(注意：請勿顛倒添加順序)。充分混勻后，室溫靜置 10~25 min 以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如 Falcon 5 mL /14 mL 離心管。
3. 轉染細胞：直接向每個孔中加入 DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉染時，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復合物。轉染 3 h 后，添加1/2體積的包含 30%血清的生長培養(yǎng)基。
4. 孵育細胞和分析結果：在 CO2培養(yǎng)箱中 37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染后zui快 7h 即可檢測到轉入基因的表達。請自行確定檢測時間。
轉染試劑的使用注意事項：
轉染前須保證FuGENE® 6溫度已經達到室溫，使用前須上下顛倒數次進行簡單混勻。建議使用標準的24孔板作為FuGENE® 6轉染試劑的支架。請不要將原瓶中的FuGENE® 6進行分裝。盡可能減少FuGENE® 6原液與塑料制品的表面接觸。不要使用硅化的槍頭或離心管。在稀釋FuGENE® 6時，請務必保證將FuGENE® 6直接混入培養(yǎng)基，而不要接觸到離心管。
